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vp實(shí)驗(yàn)原理及方法

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問題描述:

vp實(shí)驗(yàn)原理及方法希望能解答下

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一、實(shí)驗(yàn)原理:某些細(xì)菌分解葡萄糖生成丙酮酸,丙酮酸可進(jìn)一步脫羧生成乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在堿性環(huán)境下被氧化成為二乙酰,后者與蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成紅色的胍縮二乙酰而呈現(xiàn)紅色,為VP試驗(yàn)陽(yáng)性。

若培養(yǎng)基中胍基含量少,可加入少量含胍基的化合物如肌酸肌酐等(本試驗(yàn)加入α萘酚)可以加速其反應(yīng)。

二、試劑與器材:

1、菌種:大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣腸桿菌。

2、培養(yǎng)基:葡萄糖蛋白胨水。

3、試劑:VP試液甲液(6%α萘酚酒精溶液)和乙液(40%KOH溶液)三、操作步驟:Barritt法:將大腸埃希氏菌和產(chǎn)氣腸桿菌分別接種于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培養(yǎng)24h~48h,于培養(yǎng)物中先加入VP試液甲液(6%α萘酚酒精溶液)6滴,搖勻,再加入乙液(40%KOH溶液)2滴,搖勻,觀察結(jié)果。

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