代謝組學(xué)通常使用統(tǒng)計(jì)方法來篩選差異代謝物質(zhì)。一般來說，可以采用單變量分析（如t檢驗(yàn)）或多變量分析（如主成分分析、偏最小二乘法回歸等）來鑒定在不同條件下顯著變化的代謝物。同時(shí)也需要進(jìn)行多重比較校正和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)以保證結(jié)果的可靠性。

代謝組學(xué)可以通過以下三步驟來篩選差異代謝物質(zhì)：明確結(jié)論+原因+1. 篩選代謝物：第一步是通過代謝組學(xué)技術(shù)手段如質(zhì)譜或核磁共振等，對(duì)研究對(duì)象的生物體液、組織、細(xì)胞等進(jìn)行代謝物的篩選和檢測(cè)。

2. 鑒定差異代謝物：第二步是對(duì)篩選得到的代謝物進(jìn)行差異分析，確定其中具有顯著差異性的分子，這些分子即為差異代謝物。

3. 分析差異代謝物：第三步是對(duì)差異代謝物進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、生物學(xué)功能的鑒定和途經(jīng)分析，深入探究它們?cè)谏飳W(xué)系統(tǒng)中調(diào)節(jié)和影響的機(jī)理，以期更深層次地疾病發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制。因此，代謝組學(xué)通過上述步驟在分子層面上為疾病的早期診斷、評(píng)估和分子機(jī)制研究提供了重要工具和手段。

方法主要有以下三種:

1.

倍數(shù)變化法(FC值)

2.

T檢驗(yàn)法(P值、FDR值)

3.

(O)PLS-DA法(VIP值) 一、倍數(shù)變化發(fā) 倍數(shù)變化法即根據(jù)代謝物的相對(duì)定量或絕對(duì)定量結(jié)果,計(jì)算某個(gè)代謝物在兩組間表達(dá)量的差異倍數(shù)(Fold Change),簡(jiǎn)稱FC值。假設(shè)A物質(zhì)在對(duì)照組中定量結(jié)果為1,在疾病組中定量結(jié)果為3,那么此物質(zhì)的FC值即為3。

1

將待測(cè)樣本用4℃預(yù)冷的pbs清洗2次，加入超純水勻漿，渦旋，加入提取液，渦旋，超聲破碎2次，沉淀，離心，將上清冷凍干燥后得到粉狀代謝混合物，將代謝混合物于-80℃下凍存，備用；

2

先將第一步凍存的代謝混合物復(fù)溶...

3

確定每種代謝物質(zhì)；

4

篩選顯著性差異代謝物質(zhì)。